小鼠單核巨噬細胞白血病細RAW264.一般為圓形或橢圓形，小而透亮。因為其具有較強的吞噬能力，并在吞噬抗原后釋放趨化因子，促使細胞分化出偽足，粘附攀爬能力也因此增強。若細胞吞噬抗原過多、培養環境惡劣就會促使細胞呈現出梭形、長梭形，鏡下觀察就會發現細胞形態變為梭形且面積變大，不再是具有細長偽足的類圓形小細胞。這也是出現消化困難的一個主要原因。

　　小鼠單核巨噬細胞白血病細RAW264.7的培養注意事項和要點：

　　1.由于RAW264.7細胞易有不同形態，傳代時就會發現形態變為梭形的細胞很難消化下來，輕敲培養皿細胞不會脫落，用力吹打又容易對細胞產生較大損傷，因此要盡量避免細胞發生形態改變。即在接種細胞時保持一個適中的傳代密度，避免其向終末細胞分化，因為一旦細胞發生分化變為長形是無法恢復的，這是培養RAW264.7細胞時最需要注意的問題。

　　2.RAW264.7細胞喜歡連片生長，正常狀態下應該是一小片一小片的分布在培養皿中，片片之間不相連接，等到長到更多更密的時才會連成大片，但同時也會疊加成層，容易出現部分細胞飄起無法貼壁的問題。所以，要關注好細胞的匯合程度，控制好細胞的生長速度，不能等到疊加成層時才去傳代。

　　3.RAW264.7細胞傳代后貼壁時間較短，半小時左右絕大部分細胞就能夠貼下去，剛貼壁時細胞呈圓形，折光度很好，鏡下觀察如小珍珠狀一個個地散落于培養皿中。生長一段時間后，部分細胞會變成類似四角形，伸出偽足之類的。這個時候就是在提醒你注意傳代了，此時無論匯合度如何都需要進行傳代了，因為形態發生改變的細胞對實驗結果會產生較大影響，最終造成實驗數據不理想。

　　4.在細胞生長的初始階段，細胞以貼壁的形式生長并呈現出長方體的形態和有“偽足”延伸。隨著培養時間的增加，細胞呈現圓形并以疊加的形式生長。細胞密度達到一定的程度，會有細胞以懸浮的方式散落到到培養基中，鏡下觀察會同時出現懸浮和貼壁兩種形態。

　　5.該細胞傳代時不需要用胰酶消化。傳代時，吸走部分培養液，留下少許培養液（例如使用T25培養瓶留下2 ml），用無菌細胞刮刮拭培養表面將細胞刮落，充分吹打后接種到新的裝有新鮮培養液的培養瓶內，混勻后進行培養。

　　6.該細胞形態上包含松散貼壁的紡錘形和圓形或者立方形。當細胞密度較大時，細胞會輕微脫落變圓或者許多細胞堆積在一起，有些細胞甚至脫落漂浮。這些漂浮的細胞是存活的，在傳代時應收集起來，離心后細胞沉淀可以繼續培養。

　　7.血清質量差異可能引起細胞貼壁能力變化，建議選用高質量的胎牛血清。