l 細胞鑒定

l 細胞來源

l 細胞背景

該細胞來源于德國DSMZ（German collection of microorganisms and cell cultures），源于C57BL/6小鼠小膠質細胞，表達核v-myc、染色體v-raf癌基因，表面表達envgp70抗原，在形態學、表型及功能上有吞噬細胞的特征。 免疫組化結果顯示細胞為MAC1,MAC2陽性，而MAC3，膠質細胞原纖維酸性蛋白，半乳糖腦苷脂為陰性。

l 細胞特性

1） 來源：小鼠腦

2） 形態：上皮細胞樣 松散貼壁，懸浮和貼壁細胞混合生長

3） 含量：>1x106  細胞數

4） 規格：T25瓶或者1mL凍存管包裝

5)  用途：僅供科研使用。

l 培養條件：

2）培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度。

l 注意事項：

1. 收集：將培養瓶中的懸浮的細胞收集到離心管中。用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。由于細胞貼壁不牢PBS潤洗后細胞會脫落所以PBS也要回收到離心管中。

2. 加入0.25％（w / v）胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培養瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL）置于37℃培養箱中消化1-2分鐘（難消化的細胞可以適當延長消化時間），然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加入3-4ml含10?S的培養基來終止消化。

3. 將收集到的懸浮細胞、pbs清洗液中的細胞和消化下來的貼壁細胞以1000rpml離心5min，棄去上清，補加1-2mL培養液后重懸混勻后將細胞懸液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照說明書要求配置的新的*培養基以保持細胞的生長活力，后續傳代根據實際情況按1:2~1:5的比例進行。

3） 細胞凍存: 收到細胞后建議在培養前3代時凍存一批細胞種子以備后續實驗使用。

l 運輸形式：

l 生物安全：

1. 所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性，必須在二級生物安全臺內操作，并請注意防護，所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。

2. 建議在復蘇凍存細胞時始終使用防護手套、衣服和戴上防護面罩。注意：凍存管浸沒在液氮中會泄漏，并會慢慢充滿液氮。解凍時，液氮轉化成氣相可能導致容器爆炸或用危險力吹掉其蓋子，從而產生飛揚的碎屑造成人員傷害。